超碰成人在线免费 I 国产精品理论片在线观看 I 国产精品爽爽爽 I 色一情一乱一伦一区二区三区日本 I 国产精国产精品 I 免费毛片av I 日韩精品一区二区在线视频 I 亚洲一区在线视频 I 少妇私密会所按摩到高潮呻吟 I 亚洲国产真实交换 I 各种少妇正面着bbw撒尿视频 I 久久午夜夜伦鲁鲁片无码免费 I 成人性生交片无码免费看 I 91热国产 I 国产第八页 I 在线观看国产成人 I 91视频在线免费观看 I 国产精品美女久久久网站 I 精品卡1卡2卡三卡免费网站 I 亚洲精选一区二区 I 成人cijilu福利区在线观看 I 亚洲浮力影院久久久久久 I 天海翼一区二区三区高清在线 I 岛国4k人妻一区二区三区 I 精品久久人妻av中文字幕 I 吃奶揉捏奶头高潮视频 I 99er国产这里只有精品视频免费 I 日韩中文字幕无砖 I 成人在线观看视频网站 I 污的网站在线免费观看 I 日韩激情片免费 I 99er精品视频 I 99在线看视频 I 色哟哟裸体视频网站 I 欧美理论电影在线播放

乳腺癌細(xì)胞；MDA-MB-453操作步驟:

1、貼壁細(xì)胞的消化

①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。

②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。

③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理； 

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕； 

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 

5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。