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　　ELISA是指以酶作為標(biāo)記物、以抗原和抗體之間免疫結(jié)合反應(yīng)為基礎(chǔ)的固相吸附測定方法。因此，一個ELISA測定試劑，其有機(jī)組成部分包括：包被的抗原或抗體的固相支持物，即聚苯乙烯塑料微孔或試管；酶標(biāo)記的抗體或抗原和酶的反應(yīng)底物等。
 

　　抗原或抗體的固相化，并不影響其免疫結(jié)合活性，酶標(biāo)記的抗體或抗原亦是如此，并且標(biāo)記酶的活性不因標(biāo)記過程而喪失。整個測定中，醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理抗原與抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相支持物上進(jìn)行，反應(yīng)結(jié)果的判斷，以酶與其底物作用后的顯色或產(chǎn)生熒光或發(fā)光反應(yīng)為標(biāo)準(zhǔn)，顯色或產(chǎn)生熒光或發(fā)光的強(qiáng)度，與臨床標(biāo)本中待測物的濃度成正比或反比關(guān)系。目前國內(nèi)的ELISA試劑盒均以酶的顯色反應(yīng)來完成測定。
 

　　Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)反應(yīng)時間注意事項(xiàng)：
 

　　、在備孔稀釋好待測樣品和標(biāo)準(zhǔn)品；
 

　　2、上板:應(yīng)從后一孔上完板開始計(jì)時，以確保反應(yīng)時間；
 

　　3、加底物：應(yīng)從加一孔開始計(jì)時，以確保加終止液時的反應(yīng)時間是5分鐘。
 

　　ELISA試劑盒注意事項(xiàng)：
 

　　、標(biāo)本宜在新鮮時檢測。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反響。保存過久可發(fā)作聚合在ELISA中可使本底加深。
 

　　2、凍住標(biāo)本溶解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，散布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛混合，不要在混勻器上激烈震蕩。
 

　　3、污濁或有沉積的標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾，弄清后再檢測。
 

　　4、反復(fù)凍融會使蛋白效價(jià)下降，所以代測樣本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。