細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

KYSE-30人食管鱗狀細胞癌細胞

商品屬性

商品介紹

種屬來源：人

性別年齡：男性，64歲

生長特性：貼壁生長

細胞形態：上皮細胞樣

細胞規格：1 X 106cells/T25或1 mL凍存管

培養條件：RPMI 1640/ Ham's F12 + 10% fetal bovine serum (FBS)+1%P/S37 ℃, 5% CO2

凍存條件：90% FBS + 10% DMSO

傳代方法：1:3-1:5傳代, 2-3天傳1代

細胞傳代培養操作步驟：

（1）當顯微鏡下細胞形態和生長密度達到90%時，進行傳代。

（2）吸棄培養液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養瓶放入37℃培養箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養瓶使剩余細胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細胞懸液吸至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。

（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養瓶中，補充培養液并搖勻，放置37℃的CO2培養箱進行培養。

（8）根據細胞生長狀態確定換液或傳代時間。

（9）細胞凍存

細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態的依據。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

公司正在出售的產品：

大鼠類(TPS)檢測試劑盒 ，英文名： TPS ELISA Kit

Mouse free prostate specific aigen (fPSA) ELISA Kit 小鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)檢測試劑盒

Ratapelin12,AP12ELISAKit 大鼠apelin12(AP12)檢測試劑盒 進口分裝

CLIAKitforGABA(HumanGamma-aminobyricacid)ELISAKit人γ氨基

細胞過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性熒光定量檢測試劑盒20次

RatProgesterone,PROGELISAKit大鼠孕激素/孕同(PROG)檢測試劑盒

CSNK2A1重組小鼠 CSNK2A1 / CK2A1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

促生長激素釋放激素(GHRH)重組蛋白 Recombinant Growth Hormone Releasing Hormone (GHRH)

LIF重組人 LIF 蛋白  Protein

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 標簽)

TNFSF8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (His 標簽)

AD7C-NTP/NTP/AF peptide 神經絲蛋白蛋白多肽抗原(人 0.5mgAD7C-NTP/NTP/AF peptide 神經絲蛋白蛋白多肽抗原(人)

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 標簽)

FCGR1重組小鼠 CD64 / FCGR1 蛋白 (His & AVI 標簽), Biotinylated Protein

REG4 Protein Rat 重組大鼠 REG4 蛋白 (His 標簽)

MSLN重組人 MSLN / Mesothelin 蛋白  Protein

KYSE-30人食管鱗狀細胞癌細胞小鼠二?；视?span>(DAG/DG)檢測試劑盒

Rat endothelial niic oxide syhase 3 (eNOS-3) ELISA Kit 大鼠內皮型合成酶3(eNOS-3)檢測試劑盒

Humahrombihrombomodulincompound,T-TMELISAKit 人血栓調節蛋白復合物(T-TM)檢測試劑盒 進口分裝

Humanapoptosisproteaseactivatingfactor-1,Apaf-1檢測試劑盒人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)檢測試劑盒

植物葉片活性葉綠體分離試劑盒20次

Humaissueinhibitorsofmetalloproteinase4，TIMP-4ELISAKit人基質金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)檢測試劑盒

酰基轉移酶（AAT）試劑盒   可見分光光度法   50管/48樣

脫羧酶（PDC）試劑盒   紫外分光光度法    50管/48樣

脂蛋白酯酶（LPL）＆肝脂酶（HL）試劑盒   可見分光光度法    50管/24樣

甘油三酯（TG）含量測定試劑盒   可見分光光度法    50管/48樣